Seguindo a metodologia descrita na secção respetiva (2.3.) procedeu-se à colheita de plantas para extração, caracterização e estudo da atividade antifúngica dos óleos essenciais.
Os óleos essenciais de Daucus carota subsp. halophilus foram extraídos com rendimentos de 0,4% para as umbelas em antese e variando entre 0,6% e 1% (v/p) nas umbelas com frutos maduros.
Os óleos foram analisados por CGL e CGL-EM e a composição qualitativa e quantitativa está apresentada na Tabela 31, onde os compostos estão listados em ordem de eluição na coluna de polidimetilsiloxano.
A composição dos óleos obtidos a partir de umbelas colhidas em duas localidades diferentes do Algarve (Cabo de S. Vicente e Arrifana) é no geral semelhante. No entanto, existem algumas diferenças importantes entre os óleos, dependendo do estágio de desenvolvimento da planta, particularmente na quantidade de fenilpropanóides. As amostras obtidas de umbelas em antese são predominantemente constituídas por hidrocarbonetos monoterpénicos (64,9-76,8%), sendo o sabineno o principal constituinte (28,3-33,8%), enquanto os principais compostos dos óleos obtidos a partir das umbelas com frutos maduros são a elemicina (26-31%) e o sabineno (27,6-29%). A elemicina atinge apenas 6,2% e 5,9%, respetivamente, nos óleos obtidos de umbelas em antese (amostras 1 e 3).
Tabela 31: Composição química dos óleos essenciais de Daucus carota subsp. halophilus no Algarve: Cabo de S. Vicente e Arrifana (amostras 1 e 3 – umbelas em antese; amostras 2 e 4 – umbelas com frutos maduros).
IRa |
IRb |
Compostosa |
Percentagem (%) |
|||
Cabo de S. Vicente |
Arrifana |
|||||
1 |
2 |
3 |
4 |
|||
922 |
1030 |
α-Tujeno |
0,4 |
0,3 |
0,4 |
0,2 |
930 |
1030 |
α-Pineno |
12,6 |
10,1 |
16,0 |
12,2 |
943 |
1073 |
Canfeno |
0,5 |
0,5 |
1,0 |
0,3 |
964 |
1128 |
Sabineno |
28,3 |
27,6 |
33,8 |
29,0 |
970 |
1118 |
β-Pineno |
2,3 |
2,8 |
5,1 |
2,5 |
980 |
1161 |
Mirceno |
3,2 |
2,6 |
4,7 |
2,0 |
997 |
1171 |
α-Felandreno |
v |
v |
0,1 |
0,1 |
1010 |
1187 |
α-Terpineno |
1,4 |
0,4 |
1,4 |
0,3 |
1011 |
1275 |
p-Cimeno |
0,1 |
0,3 |
0,1 |
0,2 |
1020 |
1206 |
Limoneno |
11,8 |
6,5 |
11,0 |
5,5 |
1020 |
1215 |
β-Felandreno |
0,5 |
0,2 |
v |
0,1 |
1025 |
1235 |
Z-β-Ocimeno |
0,5 |
0,2 |
0,2 |
0,1 |
1035 |
1250 |
E-β-Ocimeno |
0,1 |
v |
v |
v |
1046 |
1249 |
g-Terpineno |
2,6 |
0,8 |
2,3 |
1,0 |
1050 |
1458 |
trans-Hidrato de sabineno |
0,2 |
0,4 |
0,3 |
0,3 |
1076 |
1288 |
Terpinoleno |
0,5 |
0,2 |
0,6 |
0,2 |
1081 |
1543 |
Linalol |
0,5 |
1,1 |
1,2 |
1,0 |
1081 |
1542 |
cis-Hidrato de sabineno |
0,1 |
0,1 |
0,2 |
0,1 |
1105 |
1556 |
cis-p-2-Menteno-1-ol |
0,3 |
0,2 |
0,4 |
0,1 |
1118 |
1515 |
Cânfora |
– |
0,1 |
v |
– |
1120 |
1620 |
trans-p-2-Menteno-1-ol |
0,2 |
0,1 |
v |
v |
1135 |
1553 |
Pinocarvona |
– |
0,1 |
v |
v |
1144 |
1695 |
Borneol |
– |
v |
v |
v |
1158 |
1597 |
Terpineno-4-ol |
4,8 |
2,1 |
4,1 |
2,0 |
1169 |
1692 |
α-Terpineol |
0,3 |
0,2 |
0,3 |
0,2 |
1177 |
1673 |
cis-Piperitol |
v |
0,1 |
v |
v |
1187 |
|
trans-Piperitol |
v |
– |
v |
v |
1264 |
1574 |
Acetato de bornilo |
0,2 |
0,3 |
0,6 |
0,1 |
1330 |
|
d-Elemeno |
0,3 |
0,4 |
0,6 |
0,4 |
1328 |
1688 |
α-Acetato de terpenilo |
0,4 |
0,1 |
0,1 |
0,1 |
1346 |
|
α-Longipineno |
0,3 |
0,1 |
v |
0,1 |
1369 |
1487 |
α-Copaeno |
v |
v |
v |
0,1 |
1369 |
2006 |
Metileugenol |
0,3 |
0,1 |
0,1 |
t |
1383 |
1586 |
β-Elemeno |
v |
0,1 |
v |
0,1 |
1405 |
1563 |
α-Cedreno |
0,3 |
0,1 |
v |
0,1 |
1411 |
1563 |
Aristoleno |
0,2 |
0,2 |
v |
v |
1411 |
1590 |
E-β-Cariofileno |
1,4 |
0,8 |
0,6 |
0,5 |
1442 |
1662 |
α-Humuleno |
0,1 |
0,1 |
v |
v |
1446 |
1661 |
trans-β-Farnesol |
0,3 |
0,2 |
v |
v |
1461 |
2219 |
E-Metilisoeugenol |
7,4 |
6,9 |
0,7 |
0,5 |
1466 |
1699 |
Germacreno D |
0,3 |
0,2 |
0,1 |
0,1 |
1484 |
1724 |
Biciclogermacreno |
0,3 |
0,2 |
0,3 |
0,2 |
1489 |
|
β-Himachaleno |
0,3 |
0,1 |
0,1 |
0,1 |
1498 |
1720 |
β-Bisaboleno |
5,3 |
1,8 |
0,4 |
0,4 |
1508 |
1751 |
d-Cadineno |
0,6 |
0,2 |
0,3 |
0,2 |
1518 |
|
Elemicina |
6,2 |
26,0 |
5,9 |
31,0 |
1530 |
1766 |
E-α-Bisaboleno |
0,3 |
0,2 |
v |
0,1 |
1542 |
1816 |
Germacreno B |
0,2 |
0,1 |
v |
0,1 |
1557 |
1968 |
Óxido de Cariofileno |
0,1 |
0,3 |
0,3 |
0,2 |
1618 |
2174 |
T-Muurolol |
0,3 |
0,2 |
v |
v |
1630 |
2219 |
T-Cadinol |
0,1 |
0,2 |
0,1 |
0,1 |
1630 |
2216 |
α-Cadinol |
0,7 |
0,2 |
0,2 |
0,1 |
1663 |
|
β-Bisabolol |
0,1 |
0,1 |
v |
v |
1668 |
|
Cânfora de juniperus |
0,7 |
0,6 |
0,3 |
0,2 |
1777 |
|
Isocalamendiol |
0,3 |
0,3 |
0,1 |
0,1 |
|
|
Hidrocarbonetos monoterpénicos |
64,9 |
52,6 |
76,8 |
53,8 |
|
|
Monoterpenos oxigenados |
7,1 |
5,0 |
7,5 |
4,0 |
|
|
Hidrocarbonetos sesquiterpénicos |
10,0 |
4,6 |
2,8 |
2,7 |
|
|
Sesquiterpenos oxigenados |
2,6 |
2,1 |
1,2 |
0,8 |
|
|
Fenilpropanoides |
13,9 |
33,0 |
6,7 |
31,6 |
|
|
Total identificado |
98,5 |
97,3 |
95,0 |
92,9 |
v: vestígios (< 0.05 %); IRa: Índices de retenção na coluna SPB-1; IRb: Índices de retenção na coluna SupelcoWax-10.
a Compostos ordenados por ordem de eluição na coluna SPB-1.
Parte do material propagado in vivo e in vitro foi utilizado para a caracterização dos óleos essenciais. Conforme referimos, a utilização de plantas micropropagadas permite a obtenção dos óleos de material vegetal a crescer em condições controladas, contribuindo simultaneamente para uma maior uniformidade dos óleos obtidos e para uma redução dos impactes ambientais negativos resultantes de uma recolha abusiva de plantas no campo.
Assim, as plantas micropropagadas de Daucus carota subsp. halophilus e instaladas nos viveiros do JBUC, completaram o ciclo de vida formando umbelas com frutos maduros que foram utilizadas para a extração dos óleos, seguindo a mesma metodologia, tendo-se observado que tinham composição química idêntica às plantas silvestres.
Os óleos mostraram uma variabilidade de inibição para os vários fungos testados, como se pode observar na Tabela 32. Os dermatófitos mostraram maior sensibilidade para estes óleos quando comparados com as leveduras e outros fungos filamentosos. A amostra com teores elevados de elemicina (amostra 2) mostrou ser a mais ativa com valores de CMI e CML entre 0,16 e 0,32 µL /mL e 0,32 e 0,64 µL/mL, respetivamente (Tabela 32).
Tabela 32: Atividade antifúngica (CMI e CML) dos óleos de Daucus carota subsp. halophilus contra estirpes de leveduras, dermatófitos e Aspergillus (amostra 1 – umbelas em antese; amostra 2 – umbelas com frutos maduros).
Estirpes |
Amostra 1 |
Amostra 2 |
Fluconazol |
Anfotericina B |
||||
CMIa |
CMLa |
CMIa |
CMLa |
CMIb |
CMLb |
CMIb |
CMLb |
|
Candida albicans |
2,5 |
2,5 |
1,25 |
1, 25 |
1 |
>128 |
N.T.c |
N.T. |
Candida tropicalis |
2,5 |
2,5 |
1,25 |
1,25 |
4 |
>128 |
N.T. |
N.T. |
Candida krusei |
2,5 |
2,5 |
2,5 |
2,5 |
64 |
64-128 |
N.T. |
N.T. |
Candida guillermondii |
1,25 |
1,25 |
1,25 |
1,25 |
8 |
8 |
N.T. |
N.T. |
Candida parapsilosis |
1,25 |
2,5 |
1,25 |
2,5 |
<1 |
<1 |
N.T |
N.T. |
Cryptococcus neoformans |
0,32 |
0,64 |
0,32-0,64 |
1,25 |
16 |
128 |
N.T. |
N.T. |
Trichophyton mentagrophytes |
0,64 |
0,64-1,25 |
0,16-0,32 |
0,64 |
16-32 |
32-64 |
N.T. |
N.T. |
Microsporum canis |
0,64 |
0,64 |
0,32 |
0,32 |
128 |
128 |
N.T. |
N.T. |
Trichophyton rubrum |
0,64 |
0,64-1,25 |
0,32 |
0,32-0,64 |
16 |
64 |
N.T. |
N.T. |
Microsporum gypseum |
0,64 |
0,64-1,25 |
0,32 |
0,64 |
128 |
>128 |
N.T. |
N.T. |
Epidermophyton floccosum |
0,64 |
0,64 |
0,32 |
0,32 |
16 |
16 |
N.T. |
N.T. |
Aspergillus niger |
1,25 |
>20 |
10 |
>20 |
N.T. |
N.T. |
1–2 |
4 |
Aspergillus fumigatus |
1,25 |
≥20 |
2,5 |
>20 |
N.T. |
N.T. |
2 |
4 |
Aspergillus flavus |
2,5 |
>20 |
20 |
>20 |
N.T. |
N.T. |
2 |
8 |
Resultados obtidos em três experiências independentes desenvolvidas em duplicado.
a CMI e CML determinados pelo método de macrodiluição e expressos em microlitro por mililitro (v/v).
b CMI e CML determinados pelo método de macrodiluição e expressos em micrograma por mililitro (p/v).
c Não testado.
En eumed.net: |
1647 - Investigaciones socioambientales, educativas y humanísticas para el medio rural Por: Miguel Ángel Sámano Rentería y Ramón Rivera Espinosa. (Coordinadores) Este libro es producto del trabajo desarrollado por un grupo interdisciplinario de investigadores integrantes del Instituto de Investigaciones Socioambientales, Educativas y Humanísticas para el Medio Rural (IISEHMER). Libro gratis |
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