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AISLAMIENTO DE HONGOS RESISTENTES A METALES PESADOS A PARTIR DE AGUA DE DIFERENTES RÍOS DE LA HUASTECA POTOSINA
Juan F. Cárdenas González María de Guadalupe Moctezuma-Zarate Ismael Acosta-Rodríguez CIEP. Facultad de Ciencias Químicas. Universidad Autónoma de San Luís Potosí.
RESUMEN
El objetivo de este trabajo fue el aislamiento y caracterización de hongos contaminantes resistentes a metales pesados a partir de agua de diferentes ríos de la Huasteca Potosina: Coy, Amajac, Tamazunchale, Valles, Tamuín, Bancote, La galera y Santa Rosa, y sembrando alícuotas de 100 µL en AEM, complementado con 200 ppm de diferentes metales pesados. Los hongos, se identificaron por sus características macro y microscópicas en Agar Papa Dextrosa., determinando la resistencia de los mismos por pruebas de resistencia en placa. Se aislaron e identificaron 23 especies de hongos , siendo la más frecuente Alternaria sp (30.4%), seguida de Penicillum sp y Curvularia sp,, y otras especies en porcentajes más bajos. Los hongos identificados presentan diferentes tolerancias a los metales pesados analizados, con diferentes características macro y microscópicas.
INTRODUCCIÓN Los metales pesados son elementos potencialmente tóxicos, cuya presencia en el medio ambiente se ha incrementado notablemente en las últimas décadas, fundamentalmente por la acción del hombre. La contaminación metálica supone una amenaza medioambiental importante para los seres vivos, ya que diversos metales que son micronutrientes esenciales, como el cobre y el zinc, resultan tóxicos en concentraciones elevadas, mientras que otros como cadmio, plomo mercurio y arsénico, son tóxicos a dosis mínimas (Alonso y Cols., 2004).
Recientemente, está bien establecido el potencial de adaptación de algunos microorganismos en zonas contaminadas con metales pesados, y el uso de su biomasa viva y/o muerta para tratar de eliminarlos de los diferentes nichos acuáticos contaminados. Por razones económicas, resultan de particular interés los tipos de biomasa abundante, como los desechos generados por fermentaciones industriales de gran escala o de ciertas algas que enlazan metales y se encuentran en grandes cantidad en el mar. Algunos de estos tipos de biomasa que absorben metales en cantidades elevadas, sirven como base para procesos de bioabsorción de metales, previendo su uso particular como medios muy competitivos para la destoxificacion de efluentes industriales que contienen metales y para la recuperación de metales preciosos ( Cañizares-Villanueva , 2000).
En la literatura se ha reportado el aislamiento de microorganismos resistentes a metales pesados como: Cryptococcus albidus aislada de zonas mineras de Guanajuato resistente a plata (Mendoza y cols., 1994); Thiobacillus ferrooxidans a partir de suelos ricos en azufre (Espejo y Romero, 1987) o resistentes a altas concentraciones de arsénico (Orrantia y cols., 1995; Aspergillus flavus tolerantes a metales pesados (Díaz y cols., 2002); hongos contaminantes tolerantes a plomo (Robles Galván, 1996) y la acumulación de metales pesados por macromicetos comestibles (Alonso y cols., 2004).
El aislamiento de hongos filamentosos tolerantes a metales pesados en Tangier, Morocco (Ezzouhri y cols., 2009), y la tolerancia de hongos a metales pesados (Shazia y cols., 2009). Por lo que el objetivo de este trabajo fue el aislamiento y caracterización de hongos contaminantes resistentes a metales pesados a partir de agua de diferentes ríos de la Huasteca Potosina.
METODOLOGÍA Muestras de agua Se tomaron en recipientes de plástico previamente lavados con ácido sulfúrico al 10% y esterilizados por calor húmedo, muestras de agua (500 mL), de algunos ríos de la Huasteca Potosina: Coy, Amajac, Tamazunchale, Valles, Tamuín, Bancote, La galera y Santa Rosa, y se guardaron en hielera, y se trasladaron al laboratorio y se conservaron en refrigeración hasta su uso.
Aislamiento de los hongos Se tomaron en condiciones estériles, 100 mL de cada muestra de agua, y se sembraron por duplicado en Agar Extracto de Malta (AEM) adicionado de 200 ppm de Plomo (AEM-Pb), después se incubaron a 28oC durante 7 días. Las colonias resultantes se purificaron por resiembras sucesivas en AEM-Pb y AEM. Las cepas puras de los hongos, se identificaron por sus características macro y microscópicas en Agar Papa Dextrosa.
Prueba de resistencia en placa Se prepararon cajas de Petri con 20 mL de AEM adicionado de 200 y 500 ppm de plomo, cobre, cadmio, zinc y plata, además de 100 y 200 ppm de arsénico y mercurio las que se inocularon en la parte central con 1 x 106 conidios/ mL y se incubaron a 28oC durante 7 días, y se comparo el crecimiento de las placas con respecto a un control sin metal.
RESULTADOS A partir de las diferentes muestras analizadas, se aislaron e identificaron 23 especies de hongos (Tabla No. 1), siendo la más frecuente Alternaria sp (30.4%), seguida de Penicillum sp (21.7%) y Curvularia sp, seguido de otras especies en porcentajes más bajos (Tabla No. 2). Los hongos identificados presentan diferentes tolerancias a los metales pesados analizados, con diferentes características macro y microscópicas (Tabla No. 3).
Tabla No. 1.-Coloniasde hongos identificadas en las muestras analizadas. Fuente Colonia Total (Río) Identificada
* 7 días de incubación, 28oC, AEM-Pb, AEM.
Tabla No. 2.- Frecuencia de hongos encontrados Microorganismo Número Porcentaje
Tabla No. 3.- Análisis de resistencia a metales pesados de los diferentes hongos aislados
Diámetro de crecimiento (cm)
* 7 días de incubación a 28oC
DISCUSIÓN En este trabajo se aislaron 23 hongos con diferente resistencia a los metales analizados los cuales fueron Alternaria sp, Penicillium sp, Curvularia sp, A. níger, Micelio estéril, A. flavus, Cephalosporium sp, Fusarium sp y Cladosporium sp, lo que coincide con algunos reportes de la literatura (Mendoza y cols., 1994; Díaz y cols., 2002; Cañizares-Villanueva, 2000). Los hongos aislados presentan diferentes patrones de resistencia a los metales analizados, la mayoría crecen en plomo y zinc, pocos en mercurio y arsénico, y la mayor sensibilidad encontrada fue a cadmio. Estos hongos se pueden utilizar para la captación de metales pesados en solución solos o acompañados de otras biomasas, lo cual es el siguiente paso, según como se reporta en la literatura (Acosta y cols., 2004; Kratochvil, and Volesky 1998; Volesky, 2003; Volesky, 2003).
Finalmente, los resultados obtenidos indican un cambio en la microflora debido a un aumento en la contaminación por metales pesados de los ríos estudiados (Ezzouhri y cols., 2009; Shazia y cols., 2009).
BIBLIOGRAFÍA
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